본 발명은 박테리아 시토크롬 P450을 이용한 17베타-에스트라다이올로부터 대사산물의 신규한 생산방법 및 이를 위한 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 박테리아 시토크롬 P450 BM3(CYP102A1) 또는 그의 돌연변이체(mutant)를 포함하는 17베타-에스트라다이올로부터 2-히드록실산물 제조용 조성물, 키트 및 이의 생산방법에 관한 것이다.