본 발명은 박테리아 시토크롬 P450을 이용한 오메프라졸로부터 대사산물의 신규한 생산방법 및 이를 위한 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 박테리아 시토크롬 P450 BM3(CYP102A1) 또는 그의 돌연변이체(mutant)를 포함하는 오메프라졸로부터 5'-히드록실산물 제조용 조성물, 키트 및 이의 생산방법으로, 상기의 조성물, 키트 및 제조방법은 경제적이면서 고효율로 오메프라졸로부터 5'-히드록실산물을 대량생산할 수 있기 때문에 오메프라졸(omeprazole)의 대사체를 이용한 신약개발에 크게 기여할 것이다.