본 발명은 완전한 ORF 라이브러리 구축을 위한 인공제한효소를 코딩하는 유전자에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 염기서열이 알려지지 않은 미생물 혹은 유전체로부터로부터, 특정 유전자를 획득하기 위해 제작되는 유전체조각 라이브러리의 구축방법을 개선하여 선별의 효율을 크게 높이고 활성의 분석을 용이하게 할 수 있는 인공제한 효소 및 이를 포함하는 재조합 미생물 및 활성에 의해 제조된 완전한(intact) ORF(open reading frame) 라이브러리에 관한 것이다. 본 발명의 인공제한효소는 목적하는 단백질의 발굴과 발현이 단일과정으로 가능한 효율적인 방법을 제공하여, 짧은 시간에 저비용으로 유전자의 선별이 가능할 것으로 기대된다. 또한 21세기 새로운 생물자원으로 주목받는 메타게놈 (metagenome) 유래 신기능 단백질의 발굴에 본 발명의 인공 제한효소를 사용할 경우 목적하는 단백질의 발굴빈도를 현저히 증가시킬 것으로 예상된다. 인공제한효소, 융합단백질, 프로모터. 시그마요소