본 발명의 일 실시예는 폴리도파민, 전도성 고분자 및 포도당, 젖산 등과 선택적으로 반응하는 산화효소를 포함하는 감지대상물질 감지층을 포함하는 전기화학적 산화효소 기반 바이오센서 및 그 제조방법을 제공한다. 본 발명의 일 실시예에 따르면, 민감도 및 장기 안정성이 향상된 고성능 전기화학적 산화효소 기반 바이오센서 및 복잡한 공정 없이 one-pot 전기 화학 증착법을 통한 간단하고 재현성 높은 전기화학적 산화효소 기반 바이오센서의 제조방법을 제공할 수 있는 효과가 있다.