본 발명은 자연살해세포의 신규한 제조방법 및 이로부터 수득된 자연살해세포를 사용한 간암 치료 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 자연살해세포를 단시간에 대량으로 배양 가능한 신규한 제조 방법을 제공하고, 상기 방법으로 제조된 자연살해세포는 높은 항암 효과로 인하여 항암 요법으로서 사용될 수 있다.